PolyLC

HIC-material separerar proteiner på basis av hydrofob karaktär, liksom RP. HIC använder emellertid helt vattenhaltiga buffertar, behåller tertiär struktur och biologisk aktivitet. Selektiviteten är generellt överlägsen den hos RP för proteiner och för poly-peptider som är tillräckligt stora för att ha signifikant sekundär eller tertiär struktur. Typiskt elueras ett prov med en minskande gradient av ett salt, såsom sulfat- eller fosfatsalt. Proteiner elueras i enlighet med ökande ythydrofobicitet. Surfaktanter kan tillsättas till mobilfasen vid behov. Den relativa hydrofoba karaktären av PolyPROPYL A™, PolyETHYL A™ och PolyMETHYL A™ är 100, 60 respektive 15. HIC ger högre känslighet än andra separationstekniker avseende modifieringar och skillnader på aminosyranivå, särskilt (men inte nödvändigtvis) om en icke-polär grupp är involverad.

Kapaciteten för HIC är jämförbar med jonbyteskromatografi. Om inte ett protein är känt för att vara ovanligt hydrofobt, använd PolyPROPYL A™.

Använd material med 1000 Å eller 1500 Å porer för proteiner >20kDa. 1000Å ger skarpare toppar på grund av enklare diffusion in i och ut ur porerna. Den lägre ytarean och därigenom kapaciteten på 1000Å material är vanligtvis inte ett problem.

PolyLCs HIC-kolonner finns tillgängliga i innerdiametrar från 150µm nano-LC upp till preparativa 50.8mm.
Se nedan för tillgängliga partikel- och porstorlekar: