Agilent Technologies - Bio Reversed Phase

>> Länk till produktsida

Reversed Phase-(U)HPLC är en etablerad teknik för separation och karakterisering av biomolekyler inom forskning, utveckling och kvalitetskontroll. Metoden används framför allt för proteiner, peptider och biofarmaceutiska läkemedel där hög upplösning, reproducerbarhet och kompatibilitet med masspektrometri är viktiga krav.

Till skillnad från många traditionella HPLC-applikationer ställer biomolekyler höga krav på kolonnens porstruktur och ytkemi. Stora proteiner och antikroppar kräver generösa porstorlekar för att kunna diffundera in i partiklarna och interagera effektivt med den stationära fasen. Därför används ofta porstorlekar på 300 Å eller större vid bio-RP-separationer.

Agilent erbjuder ett komplett sortiment av Bio Reversed Phase-kolonner för allt från peptider och intakta proteiner till monoklonala antikroppar, antikroppsfragment och tensider i biologiska läkemedelsformuleringar. Sortimentet omfattar både fullt porösa partiklar och Poroshell-teknologi med solid kärna för snabbare analyser och hög effektivitet. Nedan presenteras några av de mest använda kolonnfamiljerna för bio-RP-applikationer.

Kataloger:
>> Agilent BioHPLC Columns.pdf
>> Agilent AdvanceBio RP-mAb Column for Large Molecule Characterization.pdf
>> Method Development Guidelines - Primary Structure Analysis.pdf

Applikation:
>> Application Compendium - Intact and Subunit Purity.pdf
>> Monitoring Product-Related mAb Fragments.pdf

PLRP-S för biomolekyler

Robust polymerbaserad RP-kolonn för stora biomolekyler

PLRP-S är en polymerbaserad Reversed Phase-kolonn utvecklad för analys och rening av biomolekyler. Den stationära fasen består av polystyren-divinylbensen (PS-DVB), vilket ger en kemiskt och termiskt stabil yta utan behov av bundna alkylfaser.

Till skillnad från silikabaserade kolonner har alla PLRP-S-kolonner samma ytkemi oavsett porstorlek. Det gör det enkelt att anpassa metoder för olika molekylstorlekar utan att påverka selektiviteten. Sortimentet omfattar porstorlekar från 100 Å till 4000 Å, vilket gör kolonnerna lämpliga för allt från peptider och proteiner till större biomolekyler.

Materialet är fritt från silanoler och metalljoner, vilket minimerar sekundära interaktioner och bidrar till god toppform, hög reproducerbarhet och lång livslängd.

Fördelar i korthet:

• Polymerbaserad PS-DVB-stationärfas
• Identisk kemi oavsett porstorlek
• Porstorlekar från 100 Å till 4000 Å
• Utmärkt kemisk och termisk stabilitet
• Fri från silanoler och metalljoner
• Analytiska, preparativa och processkaliga format
• Finns även i PEEK-lined utförande för minskade metallinteraktioner
• USP L21-klassificerad

Katalog:

>> PLRP-S for Biomolecules.pdf

Applikation:
>> PLRP-S LCMS Separation of mAbs and ADC.pdf

AdvanceBio RP mAb

Optimerad för monoklonala antikroppar

AdvanceBio RP mAb är särskilt utvecklad för karakterisering av intakta och reducerade monoklonala antikroppar. Kolonnen ger hög upplösning och reproducerbara resultat samtidigt som analystiderna minimeras, vilket gör den lämplig både för metodutveckling och rutinanalyser inom QA/QC.

Kolonnerna är packade med 3,5 µm Poroshell-partiklar och har en optimerad porstorlek på 450 Å för effektiv separation av stora proteiner och antikroppsfragment. Tack vare den höga effektiviteten kan analyser ofta genomföras snabbare än med traditionella fullt porösa partiklar.

För att underlätta metodutveckling finns flera stationära faser tillgängliga, inklusive SB-C8, C4 och difenyl.

Fördelar i korthet:

• Utvecklad för monoklonala antikroppar och mAb-fragment
• Hög upplösning för intakta och reducerade antikroppar
• 450 Å porstorlek optimerad för stora biomolekyler
• Kortare analystider med Poroshell-teknologi
• Reproducerbara resultat för utveckling och QA/QC
• Flera selektiviteter för flexibel metodutveckling

Katalog:
>> AdvanceBio RP-MAb.pdf

Applikationer:
>> Fast and High Resolution Analysis of Intact and Reduced mAbs.pdf
>> Identifying mAb Mutation Sites.pdf

AdvanceBio Surfactant Profiling

För karakterisering av tensider i biologiska läkemedelsformuleringar

Polysorbater och andra icke-joniska tensider är viktiga komponenter i formuleringar av monoklonala antikroppar (mAb) och andra biologiska läkemedel. De bidrar till att förhindra proteinaggregation och oönskade interaktioner mellan proteiner och omgivande ytor.

Tensider kan dock brytas ned under lagring och hantering, vilket kan minska deras funktion och påverka formuleringens stabilitet. Därför blir analys av tensidernas nedbrytning allt viktigare inom utveckling och formulering av biologiska läkemedel.

Agilent AdvanceBio Surfactant Profiling HPLC-kolonn är särskilt utvecklad för snabb och reproducerbar karakterisering av icke-joniska tensider och deras nedbrytningsprodukter. Den unika selektiviteten ger effektiv separation och hög upplösning av tensidernas olika komponenter.

Kolonnens 300 Å porstorlek ger god masstransport och förbättrad separation, medan 3,5 µm partikelstorlek ger robust prestanda även vid analys av prover med komplex matris, exempelvis formuleringbuffert.

Fördelar i korthet:

• Snabb separation med hög upplösning
• Utvecklad för analys av Polysorbater, Poloxamerer och andra icke-joniska tensider
• Robust även vid komplexa provmatriser
• Hög reproducerbarhet batch-till-batch.
• Kan användas vid temperaturer upp till 80 °C

Varje batch av AdvanceBio Surfactant Profiling-media testas med en blandning av polysorbat och dess huvudsakliga fettsyra för att säkerställa hög prestanda, upplösning och reproducerbarhet.

Broschyr:
>> Agilent AdvanceBio Surfactant Profiling HPLC Columns.pdf

Applikationer:

Kartläggning av poloxameroxidation i AAV-formuleringar
Poloxamer 188 används ofta i biofarmaceutiska formuleringar för att stabilisera proteiner och minska risken för aggregat. Även om poloxamerer är mer motståndskraftiga mot nedbrytning än polysorbater kan de påverkas av oxidation, vilket kan påverka produktens kvalitet. Denna applikation beskriver en snabb och enkel metod för att identifiera och följa oxidationsprodukter och andra relaterade föroreningar i poloxamerer. Metoden möjliggör tidig upptäckt av kvalitetsförändringar och stödjer övervakningen av kritiska kvalitetsattribut (CQA) i formuleringar av terapeutiska proteiner och adenoassocierade virus (AAV).
>> Application Note - Profiling Poloxamer Oxidation in Adeno-Associated Virus Formulations.pdf
>> Ensuring Product Stability - The Necessity of Polysorbate Degradation Analysis in Biopharma.pdf
>> Consumables workflow ordering guide - Polysorbate Degradation Analysis with the AdvanceBio Surfactant Profiling HPLC Column.pdf

Karakterisering av polysorbat-hydrolys med LC/ELSD
Hydrolys av polysorbater innebär att esterbindningen bryts och fettsyran frigörs från polysorbatstrukturen. De huvudsakliga fettsyrorna i Polysorbate 80 och Polysorbate 20 är oljesyra respektive laurinsyra. Mätning av fria fettsyror är ett effektivt sätt att följa nedbrytningen av polysorbater. AdvanceBio Surfactant Profiling-kolonnen ger hög upplösning mellan topparna och en snabb analys.
>> Application Note - Shining Light on Polysorbate Hydrolysis by LC-ELSD.pdf
>> ELSD - Evaporative Light Scattering Detektorer
>> Application Note - Reducing the Complexity of Polysorbate Oxidation By-Product Screening by LC-MS-MS.pdf

Zorbax 300 Å StableBond

För reproducerbara protein- och peptidseparationer

ZORBAX 300 Å StableBond har länge varit en av de mest använda kolonnfamiljerna för analys av proteiner och peptider. Kolonnerna är utvecklade för att ge hög reproducerbarhet och lång livslängd, särskilt vid lågpH-applikationer där många proteinseparationer genomförs.

StableBond-teknologin bygger på patenterade silaner som skyddar bindningen till kiseldioxiden mot hydrolytisk nedbrytning. Resultatet är en kolonn med exceptionell stabilitet vid användning av syrabaserade mobilfaser såsom TFA, myrsyra eller ättiksyra.

Kolonnfamiljen finns med flera olika stationära faser för att ge maximal flexibilitet vid metodutveckling och selektivitetsoptimering.

Fördelar i korthet:

• Mycket god stabilitet vid lågt pH
• Utvecklad för proteiner och peptider
• Kompatibel med TFA, myrsyra och ättiksyra
• Faserna C18, C8, C3, CN och difenyl
• Kan användas upp till 80 °C
• Finns för analytisk LC, kapillär-LC och nano-LC
• RRHD-versioner för UHPLC upp till 1200 bar

Katalog:
>> Zorbax 300Å StableBond.pdf

Poroshell 300Å

Snabba bioseparationer med solid core-teknologi

Poroshell 300 Å är utvecklad för laboratorier som vill kombinera hög upplösning med korta analystider. Kolonnerna använder Agilents solid core-teknologi där en solid kärna omges av ett tunt poröst skikt. Konstruktionen minskar diffusionsavståndet för stora biomolekyler och förbättrar masstransporten genom partikeln.

Resultatet är effektiva separationer av proteiner och peptider med hög upplösning och lägre mottryck än många traditionella UHPLC-kolonner. Tekniken ger dessutom möjlighet att köra snabba metoder även på konventionella HPLC-system.

Poroshell 300 Å finns med flera olika stationära faser för att optimera selektiviteten för olika biomolekyler och applikationer.

Fördelar i korthet:

• Hög effektivitet med solid core-teknologi
• Snabba protein- och peptidseparationer
• 300 Å porstorlek för biomolekyler
• Lägre mottryck än många sub-2 µm-kolonner
• Kompatibel med både HPLC och UHPLC
• Flera selektiviteter tillgängliga
• StableBond- och Extend-faser för olika pH-områden

Katalog:
>> Poroshell 300Å.pdf